【科普】如何檢測(cè)肺炎支原體及其耐藥

肺炎支原體是介于細(xì)菌與病毒之間，無(wú)細(xì)胞壁的一類(lèi)原核細(xì)胞型生物，是目前世界上已知能獨(dú)立生存的最小微生物。是引起兒童氣管炎、支氣管炎、非典型性肺炎的重要病原體，也是引起成年人社區(qū)獲得性肺炎的最常見(jiàn)病原之一。

肺炎支原體臨床表現(xiàn)多樣，以各種呼吸道器官炎性反應(yīng)最為多見(jiàn)，如咽炎、肺炎等。此外，肺炎支原體還會(huì)導(dǎo)致呼吸器官外的全身各臟器受損，對(duì)兒童身體的危害性極大。

由于肺炎支原體無(wú)細(xì)胞壁，所以對(duì)青霉素等作用于細(xì)胞壁的抗生素天然耐藥。僅對(duì)影響細(xì)菌DNA和蛋白質(zhì)合成的大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)、喹諾酮類(lèi)、氨基糖甙類(lèi)、四環(huán)素類(lèi)等藥物有反應(yīng)。

隨著大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素在臨床的廣泛應(yīng)用，耐藥現(xiàn)象開(kāi)始出現(xiàn)，自1970年日本學(xué)者在世界范圍內(nèi)首次報(bào)道了從臨床標(biāo)本中分離到對(duì)紅霉素呈現(xiàn)高度耐藥的臨床MP菌株,之后的30年間陸續(xù)有文獻(xiàn)報(bào)道出現(xiàn)對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)耐藥的MP菌株。2005年辛德莉等首次報(bào)道國(guó)內(nèi)已有MP耐藥株產(chǎn)生。

MP的耐藥機(jī)制主要包括大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素的作用部位(核糖體)基因突變及多數(shù)病原體的自身功能改變。

藥物作用靶點(diǎn)基因突變是MP主要的耐藥機(jī)制。大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素的作用機(jī)制主要是通過(guò)與MP核糖體的50S亞基23SrRNA上第2063、2064、2607、2067、2617及2611等特殊位點(diǎn)結(jié)合，以選擇性抑制MP的蛋白質(zhì)生物合成和增殖。

常用的檢測(cè)方法有MP培養(yǎng)分離、MP-IgM檢測(cè)、血清學(xué)、熒光PCR等方法。MP培養(yǎng)分離因?yàn)樾枰厥獾呐囵B(yǎng)基、培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)、實(shí)驗(yàn)操作繁瑣，檢出率不高等缺點(diǎn)，臨床上應(yīng)用較少；MP-IgM檢測(cè)因?yàn)槿菀资艿讲〕獭⒚庖郀顟B(tài)以及抗體出現(xiàn)和轉(zhuǎn)化的時(shí)間等影響，且在MP感染的早期診斷上性能不足，容易出現(xiàn)假陰性的結(jié)果；血清學(xué)方法主要通過(guò)檢測(cè)出IgM抗體或雙份血清IgG抗體滴度的增高作為感染的指標(biāo)，由于IgG抗體與機(jī)體免疫狀態(tài)有關(guān)，嬰幼兒大都免疫力低下，一般檢測(cè)不出抗體，且靈敏度較低。

目前，臨床普遍采用的實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)進(jìn)行感染的早期診斷，只需要MP-DNA少量片段，通過(guò)PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增就可以進(jìn)行檢測(cè)，靈敏度及特異性高。同時(shí)PCR檢測(cè)還能夠明確本次感染的MP是否為耐藥株，有助于臨床判斷預(yù)后，及時(shí)調(diào)整診療措施。

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